Тварини
Всі експерименти проводилися відповідно до «Керівними принципами догляду та використання лабораторних тварин», схваленими Японським фармакологічним суспільством. Кількість використовуваних тварин було зведено до мінімуму, необхідного для значущою інтерпретації даних. Дискомфорт тварин був зведений до мінімуму. Самці морської свинки альбіноса (320-540 г, Takasugi Lab. Тварини, Японія) були вбиті при вдиханні СО2.
Виділення клубової кишки морської свинки
Клубову кишку морської свинки розчленовували і поміщали в розчин Кребса-Хенселейта (мМ): NaCl, 112,08; KCl, 5,90; CaCl2, 1,97; MgCl2, 1,18; NaH2PO4, 1,22; NaHCO3, 25,00 і глюкози, 11,49. Клубову кишку поміщали під напругу (1g) в інкубатор органів з 5 мл живильного розчину. Інкубатор підтримували при 37ºC і безперервно барботіровалі сумішшю 95% O2 і 5% CO2. Тканини були простимульовані за допомогою платинового голчастим-кільцевого (кільце було розміщено на 20 мм вище підстави голки, довжиною в 5 мм) електрода. Після 60 хвилинного врівноваження в розчині Кребса-Хенселейта клубова кишка була трансмуральному простимульована (Cox and Weinstock, 1966) з монофазним імпульсами (тривалість 0,2 Гц і 0,1 мс) стимулятором (SEN-7203, Nihon Kohden, Токіо, Японія). Скорочення були записані ізотонічний, використовуючи перетворювач зміщення (NEC Type 45347, San-ei Instruments Ltd., Токіо, Японія Був досліджений ефект медикаментозного лікування скорочень, викликаних трансмуральної стимуляцією через кільцеві електроди. На початку кожного експерименту, перевіряючи стабільність, фіксували максимальний відгук на ацетилхолін (3 мкм) в кожної тканини. Середня амплітуда електрично стимульованого скорочення становила близько 30% максимального відгуку на ацетилхолін (3 мкМ електрично індуковане скорочення було майже отме ено тетродотоксином (1 мкМ) і атропіном (0,1 мкм), як описано раніше (Watanabe et al., 1997). Таким чином, електрична стимуляція індукувати холінергічні скорочення в клубової кишці морської свинки (Brookes et al., 1991). Величину судомної реакції до трансмуральної стимуляції вимірювали до і після випробування медикаментами. Скорочення (%), виражене у відсотках від судомної реакції на трансмуральних стимуляцію перед випробуванням препарату. Ймовірного агоніста ефективності (внутрішня активність) визначали шляхом порівняння максимального ефекту мітрагінін (внутрішня активність = 1,00). Гідрохлорид β-FNA проявляє незворотні антагоністичні і короткоживучі оборотні агоністичні профілі (Portoghese et al., 1980; Takemori et al., 1981). Для дослідження вплив тестованих сполук на μ-опіоїдні рецептори, клубова кишка була попередньо інкубували з β-FNA (селективний антагоніста μ-опіоїдних рецепторів), при 10, 30 або 100 нМ протягом 30 хв, а потім промита 20 разів з розчином Кребса- Хенселейта. Для видалення агонистического дії опиоидного рецептора β-FNA (Ozaki et al., 1994) промивання повторили знову з інтервалом в 15 хвилин протягом години.
Виділення мишачого насіння
Сім’явивіднупротоку миші був розрізаний і поміщені в відщеплюється MgCl2 з розчину Кребса-Хенселейта. Тканини поміщали під тиском 0,2 Па в п’ятиміліметровий інкубатор органів, що містить поживна речовина з розчину. Ванну витримували при 37ºC і безперервно барботіровалі сумішшю 95% O2 і 5% CO2. Тканини стимулювали платиновим голчастим кільцем (кільце було розміщено на 20 мм вище підставу голки довжина якої 5 мм). Після 60-хвилинного врівноваження в розчині Кребса-Хенселейта тканини трансмуральному стимулювалися за допомогою послідовності з 10 імпульсів, тривалістю 0,5 мсек, інтервалом 2 мсек при стимуляції кожну хвилину ((SEN-7203, Nihon Kohden, Токіо, Японія). Скорочення були ізотонічний записані з використанням перетворювача зміщення (NEC Type 45347, San-ei Instruments Ltd., Токіо, Японія). Вплив медикаментозного лікування на судомні скорочення, викликані трансмуральної стимуляцією, досліджувалися через кільцеві електроди. на початку кожного експерименту був по одержанні максимальний відповідь на норадреналін (30 мкМ) з 0,1 мМ аскорбінової кислоти в кожної тканини, для того, щоб перевірити його стабільності. Всі криві концентрації-відгуку були побудовані кумулятивним методом. Висота реакція сдорогі на трансмуральних стимуляцію вимірювалася до і після введення медикаментів . Скорочення виражається у відсотках від реакції судоми на трансмуральних стимуляцію перед введенням медикаменту.
Аналіз зв’язування рецептора
Цілий мозок чоловічої особини морської свинки (виключаючи мозочок) швидко видаляли, зважували, поміщали в крижаній 50 мМ буфер Тріс-HCl, pH 7,4, і негайно заморожували. Заморожені мозок зберігали при -70ºC до аналізу. Для кожного експерименту заморожені мізки двох тварин відтавали і гомогенизировали гомогенізатором Polytron ((PT 10-35, Kinematica, Littau, Швейцарія) протягом 60 секунд в 50 мМ Тріс-HCl (pH 7,4) і центрифугували при 49000 об / хв протягом 10 хв (Childers et al., 1979). Гранули знову гомогенизировали і знову центрифугували. для аналізів на зв’язування мембранні фракції були суспендировані в буфері для аналізу. Концентрацію білка вимірювали з використанням обладнання DC-білкового спектра (Bio-Rad, Richmond, VA, США). Ізотерми, насичених з’єднань, отримували шляхом інкубації ме лайливих білків з радіоактивно-міченими сполуками в різних концентраціях. Використовуючи вищевказаний розчин, аліквоти білка 0,1 мл були додані до 0,9 мл розчину міченого зразка для аналізу з немічених конкуруючими лигандами, які розчиняли в 50 мМ Тріс-HCl, (рН 7 , 4) – буфері для аналізу, у відповідних концентраціях. аналізувати розчин містив одне з наступних: 3 nM of [3 H] [D-Ala2, N-MePhe4, Gly-ol5] -enkephalin ([3 H] DAMGO), 3 nM [3 H] (5α, 7α, 8β) – (+) – N-Methyl-N- [7- (1-pyrrolidinyl) -1-oxaspiro [4.5] dec-8-yl] -benzeneacetamide ([3 H ] U69593) або 1 nM [3 H] [D-Pen2, D-Pen5] -enkephalin ([3 H] DPDPE). Інкубаційні періоди становили 3, 4 і 1 години для [3H] DAMGO, [3H] DPDPE і [3H] U69593 відповідно, при 25 ° C. Реакцію припиняли швидкої фільтрацією при зниженому тиск через фільтри зі скловолокна (Whatman GF / B, попередньо змочені в 0,3% поліетиленімін), потім додавали 4 мл, охолодженого льодом, буфера Тріс-HCl. Фільтри додатково промивали 4 мл, охолодженого льодом буфера, і залишали сушити. Радіоактивність, пов’язана з фільтрами, вимірювалася рідкої сцинтиляційної спектрометрією (Aloka LSC-5100, Токіо, Японія). Неспецифічне зв’язування для [3H] DAMGO, [3Н] DPDPE або [3H] U69593 визначали в присутності 1 мкМ немічених DAMGO, налтріндола гідрохлориду та U69593, відповідно. Всі значення були представлені як середнє ± S.E.M., що здається константа дисоціації (KD) і максимальна щільність зв’язування (Bmax) для радіолігандов були оцінені по Scatchard аналізу насиченості. Здатність немічених препаратів пригнічувати специфічне зв’язування радіоліганда було виражено як значення IC50, яке було молярної концентрацією немічених медикаментозного засобу, необхідного для зміщення 50% специфічного зв’язування. Константи інгібування (Ki) немічених з’єднань розраховували, як описано у Cheng and Prusoff (1973). Відносне спорідненість (%) 7-гідроксімітрагініна і 9-гідроксікорілангідіна для μ-, δ- і κ-опіоїдних рецепторів були розраховані за наступними рівняннями:
Відносне спорідненість (%) = (Ka for μ, δ, κ) / (Ka for μ + Ka for δ + Ka for κ) х 100%
(Ka = 1 / Ki)
Медикаменти
Препаратами, що використовуються в цьому дослідженні, були хлорид ацетилхоліну (Dai-ichi Pharmaceutical Co., Токіо, Японія), норадреналін бітартрат (Wako, Осака, Японія), DPDPE (Bachem, Torrance, CA), налоксон гідрохлорид, DAMGO, U69593, гідрохлорид налтріндола (Sigma Chemical Co., Сент-Луїс, Міссурі, США), гідрохлорид β-funaltorexamine (Research Biochemicals, Natick, MA, USA) і [3H] DAMGO, [3H] DPDPE і [3H] U69593 (NEN Life Science Products Inc., Бостон, Массачусетс, США). Мітрагінін виділяли з екстракту листя кратома. 7-гідроксімітрагінін і 9-гідроксікорілангідін були синтезовані з мітрагінін, як описано раніше (Takayama et al., 2002). Чистоту (> 99%) цих сполук перевіряли за допомогою ВЕРХ та 1 H-ЯМР (500 МГц) аналізів (Takayama et al., 2002). Мітрагінін, 7-гідроксімітрагінін і 9-гідроксікорілангідін були спочатку розчинені в 100% диметилсульфоксиде з отриманням 10 мМ розчину, а потім розбавлені дистильованою водою. β-Funaltorexamine hydrochloride спочатку розчиняли в 100% диметилсульфоксиде з отриманням 1мМ розчину, а потім розбавляли дистильованою водою. Інші медикаментозні засоби розчиняли в дистильованої воді.
Статистичний аналіз
Дані виражаються як середнє ± S.E.M. Статистичний аналіз проводили з Двухвиборочний t – тестом, для порівняння двох груп, і одностороннім аналізом дисперсії, з подальшим використанням методу поправки Бонферроні для порівняння більш ніж двох груп. Значення Р <0,05 розглядалося як статистично значуще.
Вплив 7-гідроксімітрагініна і 9-гідроксікорілангідіна на електрично індуковане скорочення в клубової кишці морської свинки
Додавання 7-гідроксімітрагініна інгібувати електрично стимульоване судорожне скорочення в залежності від концентрації, як мітрагінін і морфін. Значення pD2 становили 7,78 ± 0,08 для 7-гідроксімітрагініна, 6,50 ± 0,06 для мітрагінін і 7,02 ± 0,08 для морфіну. Отже, 7-гідроксімітрагінін володіє приблизно в 13 і 46 разів вищою ефективністю, ніж морфін і мітрагінін, відповідно. Налоксон скасовує інгібуючу дію 300 нМ 7-гідроксімітрагініна (контроль, 32,8 ± 5,3%, налоксон 10 нМ, 51,7 ± 10,2%, налоксон 300 нМ, 108,0 ± 5,3%, Р <0,001 проти. контроль), а також морфіну (контроль, 22,3 ± 7,8%, налоксон 10 нМ, 37,0 ± 9,8%, налоксон 300 нМ, 133,0 ± 13,5%, P <0,001 проти контролю, дані представляють середнє значення ± SEM на основі дослідженні п’яти тварин). 9-гідроксікорілангідін, 9-деметіловий аналог мітрагінін, ингибировал електрично стимульоване скорочення клубової кишки, але його максимальне інгібування (внутрішня активність = 0,56) була нижчою, ніж уммітрагініна. Налоксон скасував інгібуючу дію 3 мкМ 9-гідроксікорілангідіна (контроль, 49,2 ± 5,0%, налоксон 10 нМ, 60,9 ± 6,8%, налоксон 300 нМ, 110,6 ± 4,1%, Р <0,001 проти. контроль, дані представляють середнє значення ± SEM з п’яти тварин). 7-Гідроксімітрагінін (300 нМ) і 9-гідроксіціклоантінгідін (3 мкМ) не впливав на криву концентраційного відповіді для ацетилхоліну в клубової кишці. Ці результати показують, що як 7-гідроксімітрагінін, так і 9-гідроксікорілангідін мають опіоїдних агоністичного активність при тестуванні на клубової кишці морської свинки.
Залучення підтипів μ-опіоїдних рецепторів в опіоїдний ефект 7-гідроксімітрагініна і 9-гідроксікорілангідіна
У тканини клубової кишки морської свинки містяться переважно μ- і κ-опіоїдні рецептори, тоді як мишачий сім’явивіднупротоку включає δ-опіоїдні рецептори. Ми досліджували участь μ- і κ-опіоїдних рецепторів при дії 7-гідроксімітрагініна і 9-гідроксікорілангідіна з використанням клубової кишки морської свинки і сім’явивідної протоки миші. Значення pA2 для налоксону в кривих відгуку для DAMGO, U69593, 7-гідроксімітрагінін і 9-гідроксікорілангідін порівнювали в клубової кишці морської свинки. За відсутності налоксону 7-гідроксімітрагінін, 9-гідроксікорілангідін, DAMGO і U69593 перешкоджали скорочення. Криві концентрації-відгуку для 7-гідроксімітрагінін, 9-гідроксіціклоантідін, DAMGO і U69593 були зрушені вправо в безпосередній близькості до налоксон. Фактори відхилення для 7-гідроксімітрагініна, 9-гідроксіціклоантідін, DAMGO і U69593 істотно не відрізнялися від одиниці, що свідчить про їх конкурентному гальмуванні. Значення pA2 налоксону становили 8,95 ± 0,30 для 7-гідроксімітрагініна, 8,69 ± 0,31 для 9-гідроксікорілангідіна, 8,77 ± 0,35 для DAMGO і 7,50 ± 0,36 для U69593. Для вивчення участі δ-рецептора в опіоїдних ефекті 7-гідроксімітрагініна і 9-гідроксіціклоантідіна, з’єднання тестували в електростімулірованном мишачому сім’явиносній протоці, аналізували з використанням δ-опіоїдного селективного антагоніста. Налтріндол (30 нМ), δ-опіоїдний рецептор антагоніста, повністю скасував інгібуючий ефект DPDPE, але не змінив ефект 7-гідроксімітрагініна, 9-гідроксікорілангідіна, DAMGO і U69593.
Частковий агонистический ефект 9-гідроксікорілангідіна в μ-опіоїдних рецепторах в клубової кишці морської свинки
Для визначення часткової агоністичної активності 9-гідроксікорілангідіна н μ-опіоїдних рецепторах в клубової кишці морської свинки, селективних агонистах і антагоністах, які були використані. 9-Гідроксікорілангідін (30-300 nM) злегка зрушив криву концентрації-відгуку для DAMGO вправо, а значення pA2 було 7,12 ± 0,31 (фіг. 2). Коефіцієнт нахилу для DAMGO (1,36 ± 0,48) істотно не відрізнявся від одиниці. Агонистический ефект 9-гідроксікорілангідіна оцінювали з використанням μ-опіоїди-селективного і незворотного антагоніста β-FNA. Попередня обробка β-FNA (10-100 нМ) зміщувала криву концентрації-відповіді для DAMGO вправо в конкурентному режимі, не зачіпаючи максимальний відповідь. З іншого боку, попередня обробка β-FNA (10-100 нМ) не зрушується криву 9-гідроксікорілангідіна і знижував максимальний відповідь на 34%.
Вплив 7-гідроксімітрагініна і 9-гідроксікорілангідіна на зв’язування опіоїдних рецепторів в головному мозку
Аналіз конкурентного зв’язування показав, що як 7-гідроксімітрагінін, так і 9-гідроксікорілангідін пов’язані з опіоїдними рецепторами в гомогенатах мембрани головного мозку морської свинки. Спорідненість з’єднання для трьох типів опіоїдних рецепторів визначали за формулою оцінюючи інгібування зв’язування лігандів з μ-, δ- і κ-опіоїдними рецепторами. Конкретні зв’язку цих радіолігандов для типів опіоїдних рецепторів були насичується, а графіки Scatchard були лінійними. Значення KD [3H] DAMGO, [3H] DPDPE і [3H] U69593 становили 1,07 ± 0,06, 0,66 ± 0,05 і 0,87 ± 0,05 нМ відповідно. Крім того, їх значення Bmax становили 88,2 ± 15, 41,2 ± 0,74 і 78,5 ± 9,8 фмоль / мг білка, відповідно. DAMGO, 7-гідроксімітрагінін і 9-гідроксікорілангідін, пов’язані переважно з μ-опиоидом рецепторами з значеннями pKi 8,73 ± 0,04, 8,01 ± 0,03 і 7,92 ± 0,05 відповідно. Відносне спорідненість 7-гідроксімітрагініна для μ-, δ- і κ-опіоїдних рецепторів склало 89,8%, 5,6% і 4,6% відповідно. Спорідненість 9-гідроксікорілангідіна було 99,6%, <0,1% і 0,4% відповідно.
4. Дискусія
Ми виділили нове з’єднання, 7-гідроксімітрагінін, як незначну частину тайської лікарської трави – кратома (Ponglux et al., 1994). У цьому дослідженні ми вивчали його опіоїдні ефекти в ізольованому випробуванні на стиснення клубової кишки, аналізі зв’язування з рецептором і виявили, що він є сильним μ-опіоїдних агоністом.
Залучення опіоїдних рецепторів в дію 7-гідроксімітрагініна
Клубова кишка морської свинки містить популяції функціональних μ- і κ-опіоїдних рецепторів (Lord et al., 1977; Чавкін і Гольдштейн, 1981). М’язові семявиносящіе протоки містять популяції функціональних δ-опіоїдних рецепторів (Hughes et al., 1975). У цій частині дослідження показано, що 7-гідроксімітрагінін проявив інгібуючу дію на електрично викликані скорочення в клубової кишці морської свинки. Ми порівнювали значення pA2 налоксону від опіоїдних ефектів 7-гідроксімітрагініна, DAMGO і U69593. Правий зрушення кривих залежності концентрації для 7-гідроксімітрагініна в присутності налоксону підтверджує опіоїдний ефект 7-гідроксімітрагініна. Значення pA2 опиоидного антагоніста налоксону проти інгібуючої дії μ-селективного агоніста DAMGO і κ-селективного агоніста U69593 є спорідненість налоксону до μ- і κ-опіоїдних рецепторів відповідно. Значення pA2 налоксону проти 7-гідроксімітрагініна було дуже схоже на аналогічне проти DAMGO, але явно відрізнялося від U69593. Ці результати показали, що 7-гідроксімітрагінін переважно діє на μ-опіоїдний рецептор. Для вивчення участі δ-опіоїдного рецепторного у впливі 7-гідроксімітрагініна був використаний мишачий сім’явивіднупротоку. У мишачих сім’явиносних проток, 7-гідроксімітрагінін ингибировал електрично індуковане скорочення, але цей інгібуючий ефект не антагонізував антагоніста δ-опіоїдного рецептора налтріндол. З іншого боку, гальмуючий ефект δ-опіоїдного рецептора DPDPE повністю скасований налтріндолом (naltrindole). У своїй сукупності, 7-гідроксімітрагінін індукує опіоїдний ефект головним чином за рахунок активації μ-рецепторів. Гомогенати головного мозку морської свинки зазвичай використовуються як засіб оцінки множинних опіоїдних рецептор-зв’язуючих спектрів наркотичних анальгетиків. Тісна кореляція між функціональними системами in vitro і зв’язування опіоїдних рецепторів в головному мозку також було запропоновано раннє (Pert and Snyder, 1973; Lord et al., 1977). Аналіз конкурентного зв’язування показав, що 7-гідроксімітрагінін, пов’язана з опіоїдними рецепторами в гомогенати мембрани головного мозку морської свинки. Його спорідненість до трьох типів опіоїдних рецепторів було визначено шляхом оцінки інгібування зв’язування лігандів з μ-, δ- і κ-опіоїдними рецепторами. Як результат, 7-гідроксімітрагінін взаємодіяв з усіма трьома опіоїдними ділянками, але пов’язаний переважно з μ-опіоїдних рецептором. В сукупності, результати in vitro показали, що 7-гідроксімітрагінін є повного агоніста для μ-опіоїдних рецепторів.
Залучення опіоїдних рецепторів в дію 9-гідроксікорілангідіна
Опіоїдна агоністичного активність складових кратома і напівсинтетичних сполук оцінювали за допомогою скорочення судом, індукованих електричною стимуляцією. Протягом дослідження співвідношення структура-активність, було виявлено, що функціональна група при С9 в з’єднаннях, пов’язаних з мітрагінін, визначає його максимальну активність, що означає внутрішню активність на опіоїдних рецепторах. Частковий агоніст зв’язується з тим же активним ділянкою, що і агоніст, але викликає лише частковий біологічний відповідь. Тому частковий агоніст володіє більш низькою внутрішньою активністю, ніж повний агоніст. Справді, 9-гідроксікорілангідін поводиться як частковий агоніст, тоді як мітрагінін поводиться як повний агоніст опіоїдних рецепторів в клубової кишці морської свинки. Інгібуючу дію 9-гідроксікорілангідіна було антагонізував опіоїдних рецептором антагоніста налоксону в клубової кишці морської свинки, що передбачає залучення опіоїдних рецепторів в дію 9-гідроксікорілангідіна. Потім ми порівняли значення pA2 опиоидного антагоніста налоксону проти опіоїдних ефектів 9-гідроксіціклоантідіна, DAMGO і U69593. Правий зрушення кривих реакції концентрації для 9-гідроксікорілангідіна в присутності налоксону підтверджує опіоїдний ефект 9-гідроксікорілангідіна. Значення pA2 налоксону проти інгібуючої дії μ-селективного агоніста DAMGO і κ-селективного агоніста U69593 представляють спорідненість налоксону до μ- і κ-опіоїдних рецепторів, відповідно. Значення pA2 налоксону проти 9-гідроксікорілангідіна було дуже схоже на відповідні значення проти DAMGO, але явно відрізнялося від нього проти U69593. Отже, передбачається, що 9-гідроксікорілангідін діє не на κ-опіоїдні рецептори, а на μ-опіоїдні рецептори. У мишачих семявиносящіх протоках 9-гідроксікорілангідін ингибировал електрично індуковане скорочення, але цей інгібуючий ефект не був антагонізував δ-опіоїдних рецептором антагоніста налтріндола. Імовірно, що 9-гідроксікорілангідін не діє на δ-опіоїдні рецептори. У своїй сукупності, 9-гідроксікорілангідін пригнічує електрично стимульоване скорочення вибірково через μ-опіоїдні рецептори. Аналізи зв’язування рецепторів показали, що 9-гідроксікорілангідін зв’язується з опіоїдними рецепторами в гомогенати мембрани головного мозку морської свинки. Його спорідненість до трьох типів опіоїдних рецепторів було визначено оцінюванням інгібування зв’язування лігандів з μ-, δ- і κ-опіоїдними рецепторами. Оцінний спорідненість 9-гідроксікорілангідіна для μ-опіоїдних рецепторів складає приблизно в 2600 і 250 разів більше, ніж у δ- і κ-опіоїдних рецепторів, відповідно. В результаті, 9-гідроксікорілангідін має високу спорідненість і селективність для μ-опіоїдних рецепторів. Результати, отримані в вищезазначених двох системах аналізу, були узгоджені з участю μ-опіоїдних рецепторів. Загалом, часткові агоністи мають не тільки агоністичні, а й антагоністичні ефекти. Для визначення μ-опіоїдних часткових агоністичних властивостей 9-гідроксікорілангідіна, ми досліджували агонистический і антагоністичний ефект 9-гідроксікорілангідіна в клубової кишці морської свинки. 9-Гідроксікорілангідін зрушив криві концентрації-відгуку для μ-селективного агоніста DAMGO трохи правіше. Логічно стверджувати, що частковий агоніст антагонізірует фармакологічний ефект повного агоніста, який діє на той же рецептор, при концентрації, яка дає максимальний відповідь. Надалі доказ його участі в μ-опіоїдних рецепторів було отримано при попередній обробці клубової кишки за допомогою незворотного антагоніста μ-опіоїдних рецепторів β-FNA. Загальновизнано, що повний максимальний відповідь була викликана повним агоністом при дуже низьких концентраціях, які можуть займати тільки певні фракції серед всіх присутніх специфічних рецепторів. Ті рецептори, які не зайняті, коли повний максимальний відповідь вже викликаний агоністом, називають «запасними рецепторами». Препарати з високою внутрішньою активністю вимагають меншої кількості взаємодій рецептора медикаментозного засобу, ніж медикаментозні засоби з низькою внутрішньої активністю, для отримання максимального ефекту, що приводить до поняття вільних рецепторів (Furchgott, 1966). Незворотний антагоніст β-FNA, який використовується для титрування запасних рецепторів, показав зрушення кривих концентрації-відгуку для DAMGO вправо на конкурентному методі, не впливаючи на максимальний відповідь; з іншого боку, β-FNA не зрушується криву 9-гідроксікоінантідіна вправо і зменшував максимальний відповідь в тому ж діапазоні концентрацій, що і антагоніст.
Загалом, повні агоністи не потребують зв’язуванні запасних рецепторів для їх максимального ефекту, і, таким чином, повні агоністи можуть індукувати максимальний ефект в наявності деякої концентрації незворотного антагоніста, але частковий агоніст повинен пов’язувати всі специфічні рецептори, викликають резервні рецептори для отримання максимальної відповіді на терапію , і максимального відповіді, зменшеного незворотних антагоністом. Ці результати показують, що 9-гідроксікорілангідін має частково агоністичні властивості в клубової кишці морської свинки і що його активність обумовлена μ-опіоїдних рецептором активації.
Резюме
7-Гідроксімітрагінін і 9-гідроксікорілангідін мають селективність для μ-опіоїдних рецепторів в ізольованій клубової кишці морської свинки, стиснення сім’явивідної протоки мишей і аналізів зв’язування рецепторів. 7-Гідроксімітрагінін володіє повними агоністичними, а 9-гідроксікорілангідін має часткові агоністичні свойстванного на μ-опіоїдних рецепторах в дослідженні in vitro.
